Raw264.7細胞是一種常用的小鼠巨噬細胞系,具有許多研究應(yīng)用。該細胞系來源于小鼠ABJ大腸腺瘤,是一種易于培養(yǎng)和大量擴增的免疫細胞系。特點是其具有貪婪力和吞噬作用。這種細胞可以吞噬細菌、真菌、病毒、細胞碎片等多種物質(zhì),且具有抗菌、抗病毒能力。另外,還參與了體內(nèi)的免疫調(diào)節(jié)功能,它可以分泌細胞因子,如TNF-α、IL-1β、IL-6等,對免疫細胞的發(fā)育、分化和免疫反應(yīng)等起重要作用。
Raw264.7細胞對一些疾病的發(fā)生和發(fā)展具有重要作用。例如,炎癥和腫瘤都密切相關(guān)。這些細胞能夠釋放促炎癥因子和細胞因子,進而引起炎癥反應(yīng)。此外,可以通過其巨噬細胞的功能抑制腫瘤細胞生長。使用無菌實驗技術(shù)進行細胞培養(yǎng),可以獲得高質(zhì)量的Raw264.7細胞。鑒于該細胞系具有多種功能,使用還需要特別注意一些重要的事項,例如細胞傳代數(shù)、細胞滋養(yǎng)和培養(yǎng)條件的控制,細胞的維持、質(zhì)量檢測等。
RAW264.7細胞廣泛應(yīng)用于炎癥、免疫、腫瘤等領(lǐng)域的研究:
1.免疫應(yīng)答:可以誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)和產(chǎn)生各種細胞因子,如TNF-α、IL-1β、IL-6等,對外界病原微生物及其產(chǎn)生的致病物質(zhì)進行清除和抵御。
2.紫杉醇治療:紫杉醇是一種抗癌藥物,用于治療多種癌癥,可以通過體外實驗來研究紫杉醇的治療機制及其影響因素。
3.腫瘤細胞毒性:對某些腫瘤細胞具有細胞毒性,可以用于體外篩選和研究抗腫瘤藥物。
4.細胞凋亡:可以接受不同的刺激,誘導(dǎo)發(fā)生自我凋亡,可以用于模擬某些疾病病理過程的體外實驗。
RAW264.7細胞的培養(yǎng)方法:
1.培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基。
2.細胞傳代:當(dāng)細胞密度達到80-90%時,用0.05%胰酶(Trypsin)將細胞從培養(yǎng)瓶中脫落,收集細胞,用培養(yǎng)基洗滌1-2次,細胞計數(shù)后平均分配到新的培養(yǎng)器皿中。
3.細胞的維持和分離:將細胞在37℃和5%CO2的條件下維持生長,在培養(yǎng)時要及時更換培養(yǎng)基。如果需要細胞的分離,可以使用0.05%胰酶將細胞離心后,再次懸液。
4.細胞的處理:將細胞移至96或24孔培養(yǎng)板并孵育。進行藥物處理和細胞收集。
5.細胞的凍存:當(dāng)細胞達到90%的一天,吸附培養(yǎng)基后,加入5%gl單糖,并快速冷卻至-80℃保存。
6.細胞的代謝測定:可以通過MTT等熒光劑或基因表達檢測等方法進行細胞代謝測定。